Dozviete sa viac o laboratórnych chromatografických kolónach

Tenchromatografický stĺpTechnika separácie je založená na rôznych koeficientoch rozdelenia medzi fixnou fázou a mobilnou fázou v zmesi. Stacionárna fáza je zvyčajne adsorbent, ako je silikagél, hliník, polyamid atď., Ktorý je rovnomerne vyplnený v chromatografickom stĺpci. Mobilná fáza je rozpúšťadlo, ktoré privádza zmes do chromatografického stĺpca, známa tiež ako Eluent. Keď sa mobilná fáza pohybuje v chromatografickom stĺpci, každá komponent zostáva v pevnej fáze v rôznych časoch v dôsledku rozdielu koeficientu rozdelenia, aby sa dosiahla oddelenie.

Ako dôležitý nástroj na separáciu hrá laboratórna chromatografická kolón dôležitú úlohu v chemických, biologických, farmaceutických a iných oblastiach. Na základe princípu chromatografie sa môže separácia každej zložky v zmesi efektívne realizovať pomocou rozdielu koeficientu rozdelenia, adsorpčnej kapacity a rozpustnosti rôznych látok medzi fixnou fázou a mobilnou fázou. Tento dokument predstaví základný princíp, typ, metóda výberu, postup prevádzky a použitie v rôznych oblastiach laboratórneho chromatografického stĺpca.

Laboratórne chromatografické stĺpce sa dajú rozdeliť do mnohých typov podľa ich zásad pôsobenia, naplnovacieho materiálu, tvaru a veľkosti.

◆ Klasifikácia podľa zásady konania

1) Chromatografia adsorpcie: Adsorbent sa používa na oddelenie rozdielu v adsorpčnej kapacite každej zložky zmesi. Výber adsorbentu závisí od povahy látky, ktorá sa má oddeliť, ako napríklad silikagél, je vhodný na separáciu nepolárnych a polárnych zlúčenín a hliník je vhodný pre rôzne typy zlúčenín podľa kyseliny a alkálie.

2) Chromatografia stĺpca oddielu: Zmes je oddelená podľa rozdielu v koeficiente oddielu medzi fixnými a mobilnými fázami. Chromatografia v stĺpci oddielu zvyčajne používa rozpúšťadlo ako mobilnú fázu a upravuje koeficient oddielu zmenou zloženia rozpúšťadla.

3) Chromatografia na výmenu iónov: Selektívna adsorpcia a uvoľňovanie iónov v zmesi sa oddeľuje pomocou iónovej výmennej živicy. Živity iónovej výmeny majú špecifické skupiny výmeny iónov, ktoré si môžu vymieňať ióny v oddelenej látke.

◆ Zoradiť naplnením materiálu

1) Kolónik silikagélov: Silikagél je bežne používaná adsorbent, ktorý je vhodný na oddelenie rôznych organických látok. Silikónové kolóny majú vynikajúcu tepelnú a chemickú stabilitu a môžu sa použiť v širokom rozsahu pH.

2) Stĺpec alumíny: Hlinitý kolón je rozdelený do kyslého, alkalického a neutrálneho hlinitého stĺpca podľa kyseliny a alkálie, ktorý je vhodný pre rôzne typy separácie zlúčenín. Stĺpec alumina má silnú adsorpčnú kapacitu polárnych látok.

3) Polyamidový stĺpec: Polyamidový stĺpec má funkciu adsorpčnej chromatografie a rozdeľovacej chromatografie a je vhodný na separáciu zlúčenín, ktoré môžu tvoriť vodíkové väzby s polyamidom, ako sú fenoly, kyseliny, chinóny atď.

◆ Zoradiť podľa tvaru a veľkosti

1) sklenený stĺpec: Typ chromatografického stĺpca bežne používaný v laboratóriách, s výhodami priehľadnosti a ľahkého pozorovania. Veľkosť skleneného stĺpca je určená podľa množstva materiálu, ktorý sa má oddeliť, a stupňa ťažkostí od separácie a pomer priemeru k výške je zvyčajne medzi 1: 8 a 1:50.

2) Stĺpec z nehrdzavejúcej ocele: Stĺp z nehrdzavejúcej ocele má výhody odporu korózie a odolnosti proti tlaku, ktorý je vhodný pre vysokotlakové chromatografické systémy. Použitie stĺpcov z nehrdzavejúcej ocele je relatívne zriedkavé, ale v určitých podmienkach má výhody.

Výber vhodného chromatografického kolónu je rozhodujúci na dosiahnutie účinnej separácie. Pri výbere chromatografických stĺpcov je potrebné zvážiť tieto faktory:

Laboratórne chromatografické stĺpce majú širokú škálu aplikácií vo viacerých oblastiach, vrátane, ale nielen na nasledujúce:

◆ Separácia a čistenie proteínov: Chromatografická kolóna je jedným z dôležitých nástrojov na separáciu a čistenie proteínov. Podľa rozdielu veľkosti proteínu, vlastnosti náboja a afinity je možné na separáciu a čistenie zvoliť rôzne chromatografické metódy. Napríklad chromatografia na výmenu iónov je vhodná pre proteíny oddelené vlastnosťami náboja; Chromatografia afinitnej stĺpcovej chromatografie využíva špecifické väzbové vlastnosti na izoláciu a čistenie cieľových proteínov.

◆ Separácia nukleových kyselín: Chromatografické kolóny sa môžu použiť aj na separáciu nukleových kyselín. Prostredníctvom špecifických chromatografických metód môžu byť molekuly nukleových kyselín rôznych dĺžok a štruktúr (ako sú fragmenty DNA a molekuly RNA) účinne oddelené v kolóne, aby sa uspokojili potreby následnej analýzy, sekvenovania nukleových kyselín a iných experimentov.

◆ Separácia zlúčenín malých molekúl: Medziprodukty liečiva, zložky malých molekúl v prírodných produktoch atď., sa môžu oddeliť pomocou chromatografických stĺpcov. Podľa rozdielu koeficientu rozdelenia medzi fixnou fázou a mobilnou fázou je možné zvoliť vhodnú chromatografickú metódu na separáciu a čistenie zlúčenín malých molekúl. Napríklad silikagél s reverznou fázou je vhodný na separáciu lipofilných malých molekúl; Normálny silikagél je vhodný na separáciu hydrofilných malých molekúl.

◆ Frakčné oddelenie polysacharidov: Chromatografický stĺpec sa môže použiť na frakčnú separáciu polysacharidov. Podľa veľkosti polysacharidových molekúl a štruktúry rozvetveného reťazca je možné zvoliť vhodné chromatografické techniky na oddelenie zmesí polysacharidov do rôznych úrovní, čo je užitočné pri ďalšom štúdiu vzťahu medzi štruktúrou a funkciou polysacharidov.

◆ Ďalšie aplikácie: Chromatografické kolóny sa tiež široko používajú pri separácii a extrakcii intracelulárnych produktov po zlomení buniek, separácie a čistenie aktívnych zložiek v rastlinných extraktoch, separácii a čistenie antibiotík, separácie a čistenia enzýmov, čistenie protilátok a separácia a koncentrácia vírusov. Chromatografický stĺpec navyše hrá dôležitú úlohu pri separácii a analýze petrochemických produktov, separácie a detekcie potravinových prísad, separácie a čistenie kozmetických surovín, klasifikačnú analýzu polymérnych materiálov a separáciu a čistenie prírodných korenín.